PROTEÔMICA DIRECIONADA NA ROTINA DE LABORATÓRIOS CLÍNICOS: ANÁLISE DO MARCADOR TUMORAL NEUROENDÓCRINO CROMOGRANINA A

Objetivo: A cromogranina A (CGA) é uma glicoproteína secretada por células neuroendócrinas presentes em vários tecidos; é considerada um importante biomarcador de presença e progressão de tumores neuroendócrinos. A quantificação de CGA é rotineiramente realizada por imunoensaios. Entretanto, a metodologia é suscetível a interferência de autoanticorpos, anticorpos heterofílicos e efeito gancho. Devido a essas limitações analíticas, foi desenvolvido um método para dosagem de CGA em soro por proteômica direcionada. Essa técnica foi pioneira nos laboratórios clínicos, sendo um método altamente sensível e seletivo. Método: A análise empregou a proteína recombinante inteiramente marcada como padrão interno, permitindo, portanto, a quantificação absoluta desse marcador tumoral. O processo de extração das amostras envolve o enriquecimento da proteína com uma resina polimérica em fase sólida, seguido do processo de digestão proteica. O extrato digerido é analisado por plataforma de microcromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas de alta resolução. O método foi validado de acordo com a CLSI. Conclusão: O ensaio foi desenhado para detectar porções distintas não modificadas da proteína, permitindo a diferenciação das formas de CGA liberadas por tumores. O limite de quantificação alcançado foi 50 ng/ ml; o método mostrou-se linear até 2058 ng/ml, e as imprecisões obtidas foram inferiores a 10% para todos os níveis testados. A comparação do método de proteômica direcionada com o ensaio de imunofluorescência apresentou boa correlação, com bias médio de 4,3%. A dosagem de CGA no sangue foi o primeiro teste diagnóstico no Brasil a incorporar a proteômica direcionada. A plataforma por trás dessa tecnologia, a microcromatografia associada à espectrometria de massas de alta resolução, permite um diagnóstico mais preciso, que acarreta não só a detecção do tumor, mas também o acompanhamento de sua evolução e o direcionado de tratamentos mais eficazes.